人活化素A（Activin-A）ELISA科研試劑盒是一款專門用于定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其他生物樣本中活化素A濃度的工具?；罨谹是轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）家族的成員之一，廣泛參與調(diào)節(jié)多種生物學過程，包括細胞增殖、分化、胚胎發(fā)育、免疫反應、炎癥調(diào)控及生殖等方面。該試劑盒利用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）原理，靈敏度高、特異性強，適用于基礎科研領(lǐng)域，幫助科研人員研究活化素A在多種生理及病理過程中的作用。

二、活化素A（Activin-A）背景信息

活化素A是一種二聚體糖蛋白，由兩個相同的βA亞基通過二硫鍵連接而成。它在體內(nèi)具有廣泛的生物學功能，主要包括：

1. 細胞增殖與分化：活化素A能夠調(diào)節(jié)多種細胞類型的生長和分化，包括造血干細胞、神經(jīng)細胞、肌細胞等。

2. 生殖功能調(diào)節(jié)：活化素A在調(diào)控卵泡發(fā)育和性激素分泌方面發(fā)揮重要作用，是生殖生物學研究中的一個重要因子。

3. 免疫與炎癥反應：在炎癥反應中，活化素A通過影響細胞因子的分泌和免疫細胞的活性參與免疫調(diào)控。

4. 腫瘤學：活化素A在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移中扮演復雜的角色，其表達水平的變化可能與多種腫瘤相關(guān)。

研究活化素A的表達水平有助于了解其在各種生理病理過程中的作用，如炎癥性疾病、自身免疫疾病、腫瘤、纖維化、代謝紊亂等。

三、試劑盒原理

人活化素A （Activin-A）ELISA科研試劑盒采用雙抗體夾心法原理。首先，微孔板中包被有針對活化素A的特異性抗體，加入的樣本中若含有活化素A，則其與捕獲抗體結(jié)合形成復合物。接著，加入酶標二抗，二抗與活化素A結(jié)合。隨后，通過加入底物顯色反應生成顏色，吸光度的強弱與樣本中活化素A的濃度成正比。最后，用酶標儀在450 nm波長下讀取吸光值，依據(jù)標準曲線對樣本中的活化素A濃度進行定量分析。

四、試劑盒參數(shù)

1. 試劑盒名稱：人活化素A （Activin-A）ELISA科研試劑盒

2. 檢測原理：酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）—雙抗體夾心法

3. 檢測靶標：活化素A（Activin-A）

4. 樣本類型：血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等生物樣本

5. 檢測范圍：通常為 0.1-100 ng/mL，具體范圍以說明書為準

6. 靈敏度：一般為 0.5-1.0 pg/mL，視具體批次而定

7. 樣本用量：50-100 µL，每孔

8. 檢測時間：3-5小時，具體依照實驗步驟

9. 重復性：板內(nèi)和板間變異系數(shù)(CV%)通常小于10%

10. 檢測波長：450 nm（帶 570nm 或 630nm 校正波長）

11. 標準曲線：根據(jù)標準品濃度梯度繪制標準曲線，用于定量分析

12. 保存條件：2-8°C保存，避免反復凍融

13. 有效期：6-12 個月，以試劑盒具體批次為準

14. 操作步驟：加樣、抗原-抗體結(jié)合、洗滌、加酶標抗體、顯色反應、終止反應、讀數(shù)

15. 適用范圍：適用于科研中的活化素A含量檢測，廣泛應用于細胞生物學、免疫學、腫瘤學、生殖生物學等領(lǐng)域

五、試劑盒組成

1. 包被微孔板：預包被有特異性抗活化素A抗體，用于捕獲樣本中的活化素A。

2. 標準品：提供不同濃度的活化素A標準品，用于繪制標準曲線。

3. 酶標二抗：與活化素A結(jié)合的酶標抗體，用于檢測抗原-抗體復合物。

4. 洗滌液：用于洗滌微孔板，去除未結(jié)合的成分，減少背景噪音。

5. 顯色底物：TMB底物，通過酶催化顯色反應產(chǎn)生可測顏色。

6. 終止液：用于終止顯色反應，固定顏色變化。

7. 樣品稀釋液：用于樣本的稀釋，確保樣本濃度在檢測范圍內(nèi)。

8. 板封膜：用于封閉微孔板，避免試劑和樣品蒸發(fā)。

9. 使用說明書：詳細的操作步驟和注意事項說明。

六、操作步驟

1. 樣本準備：按照說明書對樣本和標準品進行稀釋。

2. 加樣：將稀釋后的樣本和標準品加入到微孔板中，每個樣本建議做重復檢測。

3. 孵育：在適當?shù)臏囟葪l件下孵育，確保抗原和捕獲抗體充分結(jié)合。

4. 洗板：使用洗滌液清洗微孔板，去除未結(jié)合的物質(zhì)。

5. 加酶標二抗：加入酶標二抗后，孵育并再次進行洗板操作。

6. 顯色反應：加入TMB顯色底物，反應后產(chǎn)生顏色。

7. 終止反應：加入終止液，停止顯色反應，固定結(jié)果。

8. 讀數(shù)：使用酶標儀在450 nm波長下讀取吸光度值，并通過標準曲線計算樣本中的活化素A濃度。

七、試劑盒優(yōu)勢

1. 高靈敏度：本試劑盒可檢測低至1 pg/mL的活化素A，適用于低豐度樣本的檢測。

2. 特異性強：雙抗體夾心法確保了對活化素A的高度特異性，減少交叉反應。

3. 操作簡便：實驗步驟簡潔明了，便于科研人員操作。

4. 重復性好：板內(nèi)和板間的變異系數(shù)較低，確保了結(jié)果的準確性和穩(wěn)定性。

5. 廣泛應用性：適用于多種類型的生物樣本，廣泛用于基礎科學研究。

八、應用領(lǐng)域

1. 生殖生物學研究：活化素A在生殖系統(tǒng)調(diào)節(jié)、卵巢發(fā)育及生殖細胞分化中的作用研究。

2. 腫瘤學研究：研究活化素A在腫瘤的發(fā)生、進展、轉(zhuǎn)移中的功能及其作為潛在的生物標志物。

3. 免疫與炎癥研究：活化素A在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應中的角色，特別是在自身免疫疾病及慢性炎癥中的研究。

4. 細胞生物學研究：活化素A對多種細胞類型增殖、分化及細胞命運調(diào)控的影響。

5. 藥物篩選：用于評估藥物對活化素A表達及其功能的調(diào)節(jié)作用。

九、注意事項

1. 操作前應仔細閱讀說明書，并嚴格按照規(guī)定步驟進行操作。

2. 樣本在檢測前應避免反復凍融，以確保樣本的完整性和穩(wěn)定性。

3. 試驗過程中需避免樣本之間的交叉污染，尤其在加樣和洗板步驟中應格外小心。

4. 試劑盒僅供科研使用，不能用于臨床診斷。

5. 實驗中的標準品和試劑不能與其他批次的試劑盒混用。

十、總結(jié)

人活化素A（Activin-A）ELISA科研試劑盒是一款高效、靈敏的工具，廣泛適用于基礎科學研究。該試劑盒通過定量分析活化素A在多種樣本中的含量，幫助科研人員深入了解其在細胞生物學、免疫學、腫瘤學等多個領(lǐng)域的功能與機制。