賽默飛世爾 (Thermo Fisher Scientific) 的 Multiskan FC 酶標儀 使用濾光片系統(tǒng)來選擇特定的波長進行光吸收檢測。濾光片在酶標儀中起著重要作用，它能夠篩選出特定波長的光束，確保儀器能精準檢測樣品中發(fā)生的反應，從而實現(xiàn)可靠的定量分析。

1.  賽默飛世爾 Thermo FC酶標儀：Multiskan FC 酶標儀的濾光片概述

Multiskan FC 酶標儀內(nèi)置了 6位濾光片輪，這意味著用戶最多可以安裝6個不同波長的濾光片，根據(jù)實驗的需要靈活選擇波長。濾光片的選擇非常重要，因為不同實驗（如ELISA、蛋白質(zhì)定量、核酸定量等）可能需要不同波長的光進行檢測。

常見的濾光片波長包括：

• 405 nm：通常用于黃酶類反應的ELISA實驗。

• 450 nm：常用于ELISA中基于酶反應的光吸收檢測，尤其是用TMB（四甲基聯(lián)苯胺）作為底物時。

• 492 nm：也常用于ELISA中TMB底物的吸收峰檢測。

• 620 nm：作為參考波長，用于校正背景信號。

• 570 nm：用于檢測一些發(fā)色反應，比如蛋白質(zhì)和細胞生長的分析實驗（如MTT和XTT法）。

• 340 nm：適用于核酸、酶活性分析等紫外光區(qū)域的檢測。

2. 濾光片的工作原理

Multiskan FC 酶標儀的光源發(fā)出的光經(jīng)過濾光片輪時，只會允許特定波長的光通過濾光片到達樣品。這些特定波長的光束會與樣品反應后被儀器的檢測器接收并記錄吸光度值。不同的波長適用于不同的實驗反應，因此用戶可以根據(jù)實驗設(shè)計選擇適當?shù)臑V光片進行檢測。

3. 濾光片的更換和使用

Multiskan FC 酶標儀支持用戶自行更換濾光片。由于濾光片位于6位濾光片輪中，用戶可以根據(jù)實驗需求靈活配置濾光片，具體步驟如下：

1. 拆卸和安裝：用戶可以通過打開濾光片輪蓋板，輕松取出或更換濾光片，確保在更換過程中保持濾光片的清潔。

2. 濾光片選擇：通過儀器的軟件（如SkanIt軟件），用戶可以在設(shè)置實驗時選擇對應的波長，從而自動調(diào)整濾光片以匹配所需波長。

4. 濾光片的常見應用

濾光片的選擇對實驗結(jié)果的準確性至關(guān)重要。以下列舉了一些常見波長濾光片的應用場景：

• 405 nm 濾光片：用于檢測堿性磷酸酶（ALP）的ELISA實驗，也常用于一些發(fā)色底物的檢測。

• 450 nm 濾光片：常見于ELISA實驗，尤其是在使用TMB作為底物時，適合于檢測各種抗體、抗原的免疫反應。

• 492 nm 濾光片：與450 nm波長類似，適合檢測黃色發(fā)色反應，常用于免疫反應和細胞增殖實驗。

• 620 nm 濾光片：作為背景波長，用于校正樣品中的光學干擾，特別是透明度較低的樣品中。

5. 濾光片的選擇建議

根據(jù)不同的實驗需求，選擇合適的濾光片非常重要。以下是一些選擇濾光片的基本建議：

• ELISA實驗：通常需要450 nm或492 nm濾光片來檢測TMB底物的發(fā)色反應，同時620 nm作為參考波長，用于消除噪音信號。

• 蛋白質(zhì)定量：對于蛋白質(zhì)定量實驗（如Bradford法、BCA法），通常使用595 nm濾光片進行檢測。

• 核酸檢測：對于核酸分析，常使用260 nm和280 nm的濾光片，340 nm波長的濾光片也可以用于檢測酶活性分析。

6. 如何維護濾光片

為了確保濾光片的長期穩(wěn)定性和使用壽命，定期進行維護保養(yǎng)非常重要。以下是濾光片維護的一些建議：

• 保持清潔：使用時要避免指紋、灰塵或液體接觸濾光片表面，若有污染可用無絨布輕輕擦拭。

• 存放條件：濾光片在不使用時應放置在干燥的環(huán)境中，并避免暴露在陽光下，以防濾光片表面的鍍膜層老化。

• 定期檢查：定期檢查濾光片是否有劃痕、損壞或其他影響光學性能的因素，并及時更換損壞的濾光片。

7.  賽默飛世爾 Thermo FC酶標儀總結(jié)

賽默飛世爾 Multiskan FC 酶標儀配備的濾光片系統(tǒng)為實驗室提供了靈活的光學檢測選擇。通過安裝不同波長的濾光片，用戶能夠根據(jù)具體實驗需求精確選擇檢測波長，從而實現(xiàn)高精度的定量分析。無論是在ELISA、蛋白質(zhì)定量、核酸定量，還是細胞活性分析中，濾光片的選擇都是確保實驗成功的關(guān)鍵因素之一。